以優(yōu)良的庫爾勒香梨為原料，使用YEPD培養(yǎng)基，從中分離獲得100株酵母菌，按照菌落特征，形態(tài)學分析并結(jié)合ITS區(qū)基因序列同源性分析確定其種屬，確定其為葡萄汁有孢漢遜酵母（Hanseniaspora uvarum）和奧默畢赤酵母（Pichia kudriavzevii），對其進行耐糖分析。
實驗步驟
取活化好的菌液按4%接種量接種于葡萄糖含量分別為2%、5%、10%、14%、18%、22%的YPD培養(yǎng)基中，每組2個平行，恒溫水浴振蕩箱28℃、180 r/min培養(yǎng)，由于菌懸液濃度與OD600nm值成正比，所以利用比濁法，每隔6 h測定一次樣品的OD600nm值[15]，獲得試驗酵母菌的生長曲線。
結(jié)果
耐糖生長曲線及耐受性分析
菌株D4和13在不同葡萄糖含量條件下的生長曲線見圖1。由圖1A可知，隨著糖含量增加，菌株D4生長受到不同程度抑制。在糖含量18%條件下，生長量明顯下降，延滯期為12 h；在糖含量22%條件下，延滯期為48 h，且未出現(xiàn)明顯增長。可得菌株D4的最高耐糖濃度為18%。
由圖1B可知，隨著糖含量增加，菌株13生長受到不同程度抑制。延滯期為6 h時，生長量明顯下降；當糖含量為18%和22%時，菌株13的延滯期延長至48 h未出現(xiàn)明顯增長。可得菌株13的最高耐糖濃度為14%。
圖1菌株D4（A）和菌株13（B）在不同葡萄糖含量下的生長曲線Fig.3 Growth curves of strain D4(A)and strain 13(B)in different glucose concentration
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